在生命科學(xué)、環(huán)境監(jiān)測、食品藥品安全等科研檢測領(lǐng)域,樣本純度、分析精度與檢測效率直接決定研究成果的可靠性與科學(xué)性。Millipore 憑借多年在分離純化、水質(zhì)制備、細(xì)胞分析等領(lǐng)域的技術(shù)積累,構(gòu)建了覆蓋科研檢測全流程的產(chǎn)品矩陣,從樣本前處理到終端檢測支持,為科研人員提供從 “源頭到結(jié)果" 的一站式解決方案。無論是蛋白質(zhì)樣品的純化富集、環(huán)境水樣中微量污染物的檢測,還是單細(xì)胞水平的功能分析,Millipore 產(chǎn)品均以其優(yōu)異的性能與穩(wěn)定性,成為科研檢測領(lǐng)域核心工具,助力科研人員突破實(shí)驗(yàn)瓶頸,獲取高質(zhì)量、可重復(fù)的檢測數(shù)據(jù)。
樣本前處理:為精準(zhǔn)檢測奠定 “純凈" 基礎(chǔ)
科研檢測的第一步,也是最關(guān)鍵的環(huán)節(jié)之一,便是樣本前處理。雜質(zhì)干擾、目標(biāo)物質(zhì)濃度過低、樣本污染等問題,往往導(dǎo)致后續(xù)檢測結(jié)果偏差甚至失效。Millipore 的 Amicon Ultra 離心管與 Express Plus 濾膜,在樣本前處理階段構(gòu)建了 “純化 + 濃縮" 的雙重保障體系,為不同類型樣本的檢測需求提供定制化解決方案。
在蛋白質(zhì)組學(xué)檢測中,生物樣本(如血清、細(xì)胞裂解液)中高豐度蛋白質(zhì)(如白蛋白)與小分子雜質(zhì)的存在,會(huì)嚴(yán)重干擾低豐度功能蛋白的質(zhì)譜檢測。此時(shí),Amicon Ultra 離心管的切向流過濾技術(shù)展現(xiàn)出優(yōu)勢。以研究肝臟疾病相關(guān)的低豐度生物標(biāo)志物為例,科研人員需從 10mL 患者血清中富集分子量在 10-50kDa 的蛋白質(zhì)組分:將血清樣本加入 30kDa 截留分子量的 Amicon Ultra-15 離心管,在 4℃、5000×g 條件下離心 30 分鐘,即可實(shí)現(xiàn)小分子雜質(zhì)(如代謝物、鹽類)的去除,同時(shí)將目標(biāo)蛋白組分濃縮至 0.5mL 以下。該過程中,再生纖維素(RC)超濾膜對蛋白質(zhì)的吸附量低于 5μg/cm2,有效避免了目標(biāo)蛋白的損失,回收率穩(wěn)定在 92% 以上,為后續(xù)的液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS/MS)檢測提供高純度、高濃度的蛋白質(zhì)樣本,確保低豐度生物標(biāo)志物的準(zhǔn)確識(shí)別。
對于環(huán)境水樣中微生物與微量污染物的檢測,Express Plus 濾膜則成為樣本前處理的核心工具。在湖泊富營養(yǎng)化研究中,科研人員需檢測水樣中的藍(lán)藻數(shù)量與藻毒素濃度:采用 0.22μm 孔徑的 Express Plus 聚醚砜(PES)濾膜,通過負(fù)壓過濾裝置對 1L 水樣進(jìn)行過濾,濾膜可高效截留水中的藍(lán)藻細(xì)胞(截留率 > 99.9%),同時(shí)避免傳統(tǒng)纖維素濾膜因吸附作用導(dǎo)致的藻毒素?fù)p失。過濾完成后,濾膜上的藍(lán)藻細(xì)胞可直接用于 DNA 提取與 qPCR 定量分析,而濾液則可通過固相萃取進(jìn)一步富集藻毒素,用于高效液相色譜(HPLC)檢測。Express Plus 濾膜的低溶出特性(總有機(jī)碳 < 0.5ppm),確保不會(huì)向水樣中引入額外污染物,避免對藻毒素檢測結(jié)果產(chǎn)生干擾,為環(huán)境微生物與污染物的同步檢測提供可靠的樣本前處理支持。
檢測環(huán)境保障:超純水制備守護(hù) “無干擾" 分析條件
許多精密科研檢測技術(shù),如原子吸收光譜(AAS)、高效液相色譜 - 質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)等,對實(shí)驗(yàn)用水的純度有著要求。水中的離子、有機(jī)物、微生物等雜質(zhì),會(huì)直接影響檢測信號(hào)的穩(wěn)定性與準(zhǔn)確性。Millipore 的 Milli-Q IQ 7000 超純水系統(tǒng),通過四級純化工藝,為各類精密檢測提供符合國際標(biāo)準(zhǔn)的 “無干擾" 實(shí)驗(yàn)用水,成為科研檢測環(huán)境的 “水質(zhì)守護(hù)者"。
在重金屬元素檢測領(lǐng)域,原子吸收光譜對水中的金屬離子含量極為敏感,即使是 ppb 級別的雜質(zhì)也會(huì)導(dǎo)致檢測結(jié)果偏差。某環(huán)境科學(xué)實(shí)驗(yàn)室在檢測土壤浸出液中的鉛(Pb)、鎘(Cd)含量時(shí),采用 Milli-Q IQ 7000 制備的超純水(電阻率 18.2MΩ?cm,TOC<5ppb,微生物含量 < 1CFU/mL)配置標(biāo)準(zhǔn)溶液與稀釋液:系統(tǒng)的反滲透(RO)單元先去除原水中 98% 以上的離子,再通過 EDI(電去離子)單元進(jìn)一步降低離子濃度,最終經(jīng)終端 UV 燈氧化分解殘留有機(jī)物并滅活微生物。對比實(shí)驗(yàn)表明,使用該超純水配置的鉛標(biāo)準(zhǔn)曲線線性相關(guān)系數(shù)(R2)達(dá)到 0.9998,檢測限低至 0.5ppb,較使用普通蒸餾水的檢測結(jié)果(R2=0.9985,檢測限 1.2ppb)精度顯著提升,確保土壤重金屬污染檢測數(shù)據(jù)的可靠性,為環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評估提供準(zhǔn)確依據(jù)。
在分子生物學(xué)檢測中,PCR 實(shí)驗(yàn)對水中的核酸酶與有機(jī)物污染尤為敏感。在新冠病毒核酸檢測的科研驗(yàn)證階段,實(shí)驗(yàn)室需通過 RT-PCR 檢測病毒的 ORF1ab 與 N 基因:Milli-Q IQ 7000 的終端超純化柱可去除水中的核酸酶(DNase、RNase),185nm UV 燈將 TOC 降至 5ppb 以下,避免有機(jī)物對 Taq DNA 聚合酶活性的抑制。使用該超純水配置的 PCR 反應(yīng)體系,擴(kuò)增效率穩(wěn)定在 95%-105% 之間,Ct 值變異系數(shù) < 3%,確保病毒核酸檢測的靈敏度與重復(fù)性,為新冠病毒變異株的分子溯源研究提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)條件。
單細(xì)胞檢測:解鎖微觀世界的 “精準(zhǔn)視角"
隨著科研向微觀領(lǐng)域深入,單細(xì)胞水平的檢測分析成為解析細(xì)胞異質(zhì)性、揭示生命活動(dòng)機(jī)制的關(guān)鍵手段。傳統(tǒng)檢測方法難以捕捉單個(gè)細(xì)胞的功能差異,而 Millipore 的 Guava easyCyte 流式細(xì)胞儀,以其小型化、高靈敏度的特點(diǎn),為單細(xì)胞檢測提供了高效解決方案,尤其適用于稀有細(xì)胞群體與珍貴樣本的分析。
在腫瘤免疫研究中,科研人員需檢測腫瘤微環(huán)境中 CD8+T 細(xì)胞的活化狀態(tài)與細(xì)胞因子分泌情況。由于腫瘤組織中 CD8+T 細(xì)胞占比僅為 5%-10%,且樣本量有限(如穿刺活檢獲取的 1×10?個(gè)細(xì)胞),傳統(tǒng)大型流式細(xì)胞儀因樣本需求量大(需 100μL 以上)與操作復(fù)雜,難以滿足實(shí)驗(yàn)需求。此時(shí),Guava easyCyte 流式細(xì)胞儀的微毛細(xì)管流動(dòng)技術(shù)展現(xiàn)出優(yōu)勢:僅需 20μL 經(jīng)熒光標(biāo)記(CD3-PE、CD8-FITC、IFN-γ-APC)的細(xì)胞懸液,在 10 分鐘內(nèi)即可完成檢測。系統(tǒng)的共聚焦光學(xué)設(shè)計(jì)可有效區(qū)分熒光信號(hào)與背景噪聲,準(zhǔn)確識(shí)別 CD3+CD8+IFN-γ+ 的活化 T 細(xì)胞,檢測準(zhǔn)確率與大型流式細(xì)胞儀的一致性達(dá)到 96% 以上。同時(shí),InCyte 軟件內(nèi)置的 “免疫細(xì)胞表型分析" 模板,可自動(dòng)生成活化 T 細(xì)胞的比例統(tǒng)計(jì)與散點(diǎn)圖,無需復(fù)雜的數(shù)據(jù)分析步驟,助力科研人員快速掌握腫瘤微環(huán)境的免疫狀態(tài),為免疫治療靶點(diǎn)的篩選提供單細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
在神經(jīng)科學(xué)研究中,對原代神經(jīng)元細(xì)胞的活性檢測同樣依賴高靈敏度的單細(xì)胞分析工具。科研人員通過 Guava easyCyte 檢測神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡率:將經(jīng) Annexin V-FITC/PI 染色的原代神經(jīng)元細(xì)胞(5×10?個(gè))加入檢測板,系統(tǒng)通過負(fù)壓吸引形成單細(xì)胞流,488nm 激光激發(fā)熒光信號(hào),可準(zhǔn)確區(qū)分早期凋亡(Annexin V+PI-)、晚期凋亡(Annexin V+PI+)與活細(xì)胞(Annexin V-PI-)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,該系統(tǒng)對神經(jīng)元細(xì)胞凋亡率的檢測變異系數(shù) < 5%,且樣本需求量僅為傳統(tǒng)方法的 1/5,有效減少了原代神經(jīng)元細(xì)胞的損耗,為研究神經(jīng)退行性疾?。ㄈ绨柎暮D。┑募?xì)胞凋亡機(jī)制提供可靠的檢測支持。
結(jié)語:以技術(shù)創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)科研檢測進(jìn)步
從樣本前處理的 “凈化" 保障,到檢測環(huán)境的 “水質(zhì)" 守護(hù),再到單細(xì)胞水平的 “精準(zhǔn)" 分析,Millipore 產(chǎn)品矩陣深度融入科研檢測的每一個(gè)環(huán)節(jié),以其專業(yè)的技術(shù)設(shè)計(jì)與穩(wěn)定的性能表現(xiàn),為科研人員解決實(shí)際實(shí)驗(yàn)難題。在未來,隨著科研檢測技術(shù)向更高精度、更高通量、更微觀水平發(fā)展,Millipore 將持續(xù)推進(jìn)產(chǎn)品創(chuàng)新,如進(jìn)一步優(yōu)化超濾膜的選擇性與通量、提升超純水系統(tǒng)的智能化管控能力、拓展流式細(xì)胞儀的檢測通道與分析功能,為科研檢測領(lǐng)域提供更先進(jìn)、更便捷的解決方案,助力科研人員在生命科學(xué)、環(huán)境科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢測等領(lǐng)域取得更多突破性成果,推動(dòng)科研檢測技術(shù)的不斷進(jìn)步與發(fā)展。
關(guān)鍵詞:Millipore 科研檢測 樣本前處理 超純水 單細(xì)胞分析